상피성 난소암 세포주에서 Hypoxia에 의해 유도되는 miRNA-125 표적 단백 발현
Expression of miRNA-125 Target Proteins Induced by Hypoxia in Epithelial Ovarian Cancer Cell Line
- 주제(키워드) miRNA , 상피성 난소암 , 4EBP1 , hypoxia , HIF-1
- 발행기관 고려대학교 생명환경과학대학원
- 지도교수 정남현
- 발행년도 2022
- 학위수여년월 2022. 8
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 생명환경과학대학원 생명분자유전공학과
- 세부분야 해당없음
- 원문페이지 40 p
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/korea/000000269310
- UCI I804:11009-000000269310
- DOI 10.23186/korea.000000269310.11009.0001394
- 본문언어 한국어
초록/요약
상피성 난소암의 조기 예측의 어려움과 예후 불량은 새로운 조기 진단 및 치료 기술 개발의 중요성을 더욱 부각시키고 있다. 따라서 난소암의 예후에 관한 새로운 생체표식자(biomarker)들의 발굴과 분자 표적 발굴관련 연구의 중요성은 점점 커지고 있다. 항암제 개발 동향은 저분자 유기화합물 기반의 전통적인 신약 개발에서 표적 지향적 바이오분자를 활용한 신개념의 치료제 개발로 그 패러다임이 전환되고 있다. miRNA의 경우 다양한 암조직에서 변화된 miRNA를 진단을 위한 표적으로 사용하기 의해 database화는 지속적으로 진행 중이다. 이를 기반으로 창의성 있는 연구를 통해 miRNA를 이용한 항암제 개발은 중요한 신약개발의 수단이 될 가능성이 충분히 있을 것으로 생각된다. 본 연구에서는 hypoxia에 의해 유도되는 miRNA-125를 이용하여 상피성 난소암의 악성화에 관여하는 것으로 생각되는 4EBP1 단백 관련 발현양상과 암의 진행에 중요한 VEGF 조절에 어떠한 영향을 미치는지 확인하였다. 난소암 세포주에 miRNA처리 후 transfection이 되었는지를 확인함으로써 microRNA가 유전자 발현을 조정하고 형질전환에 중요한 역할을 할 수 있음을 알 수 있었다. Western blot 실험을 통해 전사인자 HIF-1는 hypoxia 환경에 더 반응하고 이에 대응하는 miRNA-125a와 miRNA-125b의 전사를 유도하여 난소암에서 hypoxia에서 조절되는 유전자가 miRNA-125임을 시사 하였으며, miRNA-125가 단백 4EBP1에 대한 하나의 표적일 가능성을 확인 하였다. miRNA-125의 표적단백 발현 양상을 통해 상피성 난소암의 암화과정에 miRNA-125가 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있었다. miRNA-125a 또는 miRNA-125b 표적 단백들의 발현 양상이 normoxia 보다 hypoxia에서 유의하게 의존적이고 각 표적 인자들이 down-regulation 되는 양상을 보임으로써 miRNA가 신생혈관 생성에 관여하는 기전을 통해 hypoxia 상태에서 조절되는 miRNA-125는 암의 진행과정 중 가장 중요한 VEGF(vascular endothelial cell growth factor)를 저해하며, miRNA-125는 상피성 난소암에서 하향 조절되는 종양 억제 miRNA라 할 수 있다.
more목차
ABSTRACT ............... i
목 차 ................... iii
LIST OF FIGURES ..... iv
I. 서 론
1. 마이크로 RNA(miRNA)의 형성과 작용기전 ........ 1
2. 마이크로 RNA(miRNA)의 발현과 암 ................. 5
II. 연구배경 및 실험방법
1. 배경 ................................. 9
2. 재료 ............................... 14
3. 실험방법 ......................... 15
III. 결 과
1. Cell transfection ...................................................... 16
2. Western blot (miRNA-125 표적 단백 발현)................. 18
IV. 고 찰 ..................................................................... 24
V. 요 약 ...................................................................... 27
VI. 참고문헌 ................................................................... 29
