Rho A downstream effectors, hDia-1 and ROCK
- 발행기관 고려대학교 대학원
- 발행년도 2004
- 학위명 박사
- 학과 대학원:의학과 감염.면역학 전공
- 식별자(기타) DL:000014914441
- 서지제어번호 000045198665
초록/요약
상피 세포의 주 세포간 유착은 E-cadherin에 의해, 칼슘 의존적으로 일어난다. 그러나 최근에 normal human epidermal keratinocyte(NHEK)를 일반적으로 세포간 유착이 유발되지 않는 저 칼슘농도(0.05mM)하에서 미세소관 분쇄를 유발하면 세포간 유착을 유발함이 관찰 되었다. 이러한 모델은 E-cadherin 의존 세포간 유착에서 세포내 신호 전달의 중요성을 시사한다. 미세소관 분쇄 유도 세포간 유착의 특징은 고 칼슘 모델과 비교하여 주로 E-cadherin의 미성숙 세포간 유착이 유발된다는 것이다. 본 연구에서는 미세소관 분쇄 모델을 이용하여 유발되는 미성숙 세포간 유착의 성숙에 관한 연구를 시행하였다. 첫 단계 실험을 통해 미성숙 세포간 유착은 기질 유착 신호와 세포간 유착 신화의 역학적 평형 관계에 있음을 보였다. 또한 RhoA associated kinase (p160ROCK)의 활성 억제에 의한 기질 유착의 억제를 유발하여 세포간 유착의 성숙이 촉진됨을 관찰하였다. 이러한 결과를 바탕으로 세포간 유착의 성숙이 p160ROCK와 상보적으로 상호 조절되는 hDia-1의 활성에 영향을 받을 것이라는 가설 하에, p160ROCK와 hDia-1의 cDNA를 클로닝 하였으며 그 기능을 조사하였다. 이러한 클로닝 과정에서 hDia-1의 deletion variants들이 발견 되었고 이런 deletion variants들에 의해 hDia-1의 활성이 조절됨을 알 수 있었다.
more목차
I.국문 초록 7
II.Introduction 8
III.재료 및 방법 13
세 포
화학 물질 및 항체
간접 면역 형광법
RNA 추출 및 역전사
hDia-1과 ROCK 클로닝
Mammalian expression vector cloning
Transfection
IV.결과 20
Part 1 : 미세소관 붕괴시 생성되는 세포간 유착 모델에서의 세포간 유착 신호와 세포 기질 유착 신호간의 관계
1. 미세소관 붕괴시 세포간 유착 모델의 특징.
2. 미세소관 붕괴시 유도 세포간 유착에서 기질 유착 신호 전달.
3. Y-27632에 의한 기질 유착 및 stress fiber 형성 억제에 의한 성숙 세포간 유착 유도.
Part II : ROCK와 hDia-1 cDNA 클로닝.
1. hDia-1 및 ROCK cDNA 클로닝.
2. hDia-1의 deletion variants의 발견.
3. hDia-1와 ROCK cDNA의 활성 확인.
4. Further perspective
IV.Discussion 42
V.영문 초록 46
VI.참고 문헌 47
