항암면역에 내성을 갖는 종양에서의 AKT의 역할 : Role of AKT in resistance of tumor cells against anti-tumor immunity
- 발행기관 고려대학교
- 발행년도 2007
- 학위수여년월 2007. 8
- 학위명 석사
- 학과 대학원 의학과 종양생물학전공
- 식별자(기타) DL:000018570707
- 서지제어번호 000045395443
초록/요약
생체 내의 면역체계가 종양의 발달과 생장을 제어하지 못하는 주요한 원인은 종양의 면역회피현상이라고 생각되어진다. 그러나 그러한 중요성에도 불구하고 면역치료가 진행되는 과정에서 면역내성을 갖는 변형체들이 어떻게 생성되는지에 대한 연구는 아직 미흡하다. 따라서, 본 연구에서는 종양의 면역회피에 대해 새로운 기작연구를 위해 생체 내 면역선택 기법을 사용하였으며 그 결과 TC-1 P0에서 새로운 면역내성 변형체인 TC-1 P3 A17을 선별해 내었다. Western Blot 분석에서 면역내성 변형체 TC-1 P3 A17은 TC-1 에 비해 AKT가 높이 활성화 되어져 있었다. 이러한 종양 내 면역내성기작과 AKT 활성화와의 역할을 설명하기 위하여, AKT의 활성화된 형태인 CA AKT 유전자를 TC-1세포에 레트로바이러스 시스템을 이용하여 형질 전환된 TC-1/CA AKT 세포주를 확립하였다. 이들은 Sig/E7/LAMP-1을 발현하는 백시니아 바이러스(Vac-Sig/E7/LAMP-1)에 의하여 유도되어지는 항암면역에 대해 내성이 증가 되었으며, 특히 E7 특이적인 CD8+ T세포 매개성 항암면역에 내성을 가지는 것을 확인할 수 있었다. 또한 TC-1/CA AKT에서의 면역내성은 p-BAD, Bcl-XL, Bcl-w 그리고 cIAP2와 같은 항세포사멸분자의 증가와 관련이 있는 것으로 보여 진다. 이러한 사실을 기반으로, 우리는 TC-1 P3 A17 종양이 형성되어져 있는 생쥐에 AKT 저해제인 API-2를 포함한 키토산 젤을 종양에 국소적으로 주사하여 Vac-Sig/E7/LAMP-1의 면역치료효능을 증가시키고자 하였다. 그 결과, 흥미롭게도 이러한 혼합치료법은 단독으로 Vac-Sig/E7/LAMP-1 으로 면역 유도 하거나 API-2를 처리해준 그룹들에 비교하여 볼 때 면역내성을 갖는 종양크기를 현격히 감소시켜주었다. 따라서 이러한 결과들은 항암면역에 대해 내성을 갖는 종양의 PI3K/AKT 세포신호과정을 저해함으로써 항암면역치료의 효과를 더욱 극대화 시켜주었으며, 면역내성을 갖는 암세포를 효과적으로 치료할 수 있는 발판을 마련한 것이라고 사료된다.
more초록/요약
Immune escape is an important reason why the immune system cannot control tumor growth, but how escape variants emerge during immunotherapy remains poorly understood. In this study, to elucidate the mechanism for the tumor immune escape, we generated a highly immune-resistant tumor cell line (TC-1 P3 A17) by subjecting a susceptible tumor cell line (TC-1 P0) to multiple rounds of in vivo immune selection. Comparative study of TC-1 and TC-1 P3 A17 revealed that AKT is highly activated in immune- resistant cell line. Then, in order to examine the functional role of AKT activation, a constitutively active form of AKT, CA AKT, was retrovirally transferred to TC-1 cells and the resulting cell line (TC-1/CA AKT) was found to show the increased resistance against a Vac-Sig/E7/LAMP-1 (Sig/E7/LAMP-1 expressing Vaccinia virus) induced anti-tumor immunity, especially against E7-specific CD8+ T cell mediated apoptosis. The immune resistance observed in TC-1/CA AKT appears to be associated with the up-regulation of anti-apoptotic molecule, such as p-BAD, Bcl-XL, Bcl-w and cIAP-2. Based upon theses findings, we sought to enhance a therapeutic efficacy of Vac-Sig/E7/LAMP-1 in TC-1 P3 A17 by an intratumoral injection of a chitosan hydrogel loading API-2, an AKT inhibitor. Interestingly, The combined therapy led to a drastic reduction of tumor volume compared with either Vac-Sig/E7/LAMP-1 immunization or AKT inhibitor treatment alone. Thus, our results suggest that inhibition of PI3K/AKT signal pathway may facilitate the therapeutic efficacy of cancer vaccines to immune-resistant tumor cells.
more