성선자극호르몬분비호르몬의 NF-kB 경로를 통한 생쥐 Raw264.7 대식세포에서의 면역 기능 조절 : GnRH modulates immune-system function via the NF-kB pathway in murine Raw264.7 macrophages
- 발행기관 고려대학교
- 발행년도 2007
- 학위수여년월 2007. 2
- 학위명 박사
- 학과 대학원 의학과 산부인과학전공
- 식별자(기타) DL:000018552406
- 서지제어번호 000045344384
초록/요약
연구배경: 성선자극호르몬분비호르몬(gonadotrophin-releasing hormone, GnRH)은 주로 생식기능에 작용하는 것으로, 최근 면역계 기능 조절의 연관성이 제시되었으나, 정확한 분자생물학적인 기전에 대하여는 잘 알려져 있지 않다. 이에 본 연구는 대식세포를 대상으로 하여, GnRH의 면역 기능에 대한 분자생물학적 기전에 대하여 조사하고자 하였다. 연구방법: GnRH를 생쥐 Raw264.7 대식세포에 적용하였다. GnRH의 생쥐 Raw264.7 대식세포에 대한 칼슘농도를 fura-2 염색을 사용하여 공초점형광현미경으로 측정하였다. 유발성 일산화질소 합성효소(inducible NO synthase, iNOS)의 발현 조절과 관련이 있으며 지질다당(lipopolysaccharide, LPS)과 인터페론 감마(interferon gamma)의 자극에 의하여 유도되는 일산화질소(nitric oxide, NO)의 생성을 조사하였다. 생물학적 타당성을 조사하기 위하여, 새롭게 분리된 일차복강내 대식세포에 대한 GnRH의 영향을 조사하였다. 그리고 분자적 기전을 조사하기 위하여, GnRH의 NF-kB(nuclear factor-kB, NF-κB)의 활동성과 Janus kinase (JAK)–signal transducer and activator of transcription (STAT) 경로에 대한 작용을 조사하였다. 결 과: GnRH는 생쥐 Raw264.7 대식세포의 세포내 칼슘 농도를 증가시켰다. NO의 생성은 지질다당과 인터페론 감마의 자극에도 불구하고 GnRH에 의하여 억제되었다. 또한 칼슘과 일산화질소에 대한 GnRH의 조절 효과는 일차로 분리된 복강내 대식세포에서도 관찰되었다. 핵인자-kB(nuclear factor-kB, NF-κB)의 활동성은 GnRH에 의하여 억제되었고 JAK-STAT 경로에 대한 작용은 관찰되지 않았다. 결 론: GnRH는 대식세포의 기능 조절에 관여하며, NF-κB 경로가 GnRH의 면역 기능 조절에 관여한 경로임을 알 수 있다.
more초록/요약
Background: Gonadotrophin-releasing hormone (GnRH), which was originally found to be reproductive process, was known to be implicated in the modulation of immune system function, but the underlying molecular mechanisms remain largely unclear. This study was designed to investigate the molecular mechanisms underlying the effects of GnRH on macrophages. Methods: GnRH was applied the murine Raw264.7 macrophages. The effect of GnRH on calcium concentration in the murine Raw264.7 macrophages was measured by confocal fluorescent microscope with dye fura-2. The production of nitric oxide (NO), whose regulation has been correlated with the induction of inducible NO synthase (iNOS), costimulated with LPS (lipopolysaccharide) and IFN- (interferon gamma), was measured. For the biological relevance of GnRH, the effects of GnRH on freshly isolated primary peritoneal macrophages were investigated. To elucidate the molecular mechanism, it was investigated whether GnRH plays a role in the modulation of the activity of nuclear factor kappa B (NF-κB) and the Janus kinase (JAK)–signal transducer and activator of transcription (STAT) pathways. Results: This study showed that GnRH was found to increase the intracellular calcium levels in murine Raw264.7 macrophages. The production of NO, costimulated with LPS and IFN-, was suppressed by exposure to GnRH. Moreover, the modulatory effects of GnRH on calcium and NO were observed in freshly isolated primary peritoneal macrophages. In addition, the activity of NF-κB was suppressed by GnRH exposure. On the other hand, the phosphorylation of JAK-STAT pathway was not affected by GnRH cotreatment. Conclusions: Taken together, these results demonstrate that GnRH participates in the functioning of macrophages and points to NF-κB as the signaling pathway associated with GnRH-mediated immune-system modulation.
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