치수 줄기세포의 특성분석
Characterization of dental pulp stem cell
- 주제(키워드) 치수줄기세포 , 조직공학 , 면역세포화학 , FACS분석
- 발행기관 고려대학교 임상치의학대학원
- 지도교수 임재석
- 발행년도 2009
- 학위수여년월 2009. 8
- 학위명 석사
- 학과 임상치의학대학원 구강악안면외과학과
- 원문페이지 22 p
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/korea/000000008593
- 본문언어 한국어
- 제출원본 000045552686
초록/요약
1. 연구목적 최근에 와서 발치 등으로 폐기되는 치아와 연관된 성체 줄기세포 채취에 대한 연구가 이루어지고 있는데 치아와 연관된 줄기세포에는 치수 줄기세포, 치근막 줄기세포, follicular stem cell, apical papilla stem cell 및 유치 줄기세포 등으로 분류되고 이에 대한 연구가 진행되고 있는 상태이다. 이에 본 연구에서는 사람의 지치 발치시 얻어지는 치수 줄기세포에 대한 형태 분석, immunocytochemistry 및 FACS 분석을 통하여 향후 임상적으로 사용 가능한 이상적인 성체 줄기세포 채취원을 규명하고자 하는 기초 연구를 시행하였다. 2. 연구재료 및 방법 하악 제3대구치 발치시 얻어지는 골막과 치수조직을 이용하여 줄기세포를 추출하였다. 환자의 동의 아래 하악 매복 지치 발거시 거상된 피판에서 5mm X 5mm 크기의 골막을 채취하고 발치부의 하악골 골수골편을 채취하여 골수 줄기세포를 추출하고 치수 줄기세포는 절단된 지치의 치수조직을 치주 큐렛을 이용하여 채취하였다. 또한 지방조직 유래 줄기세포는 환자의 동의 아래 협부 지방 조직을 채취하여 실험에 이용하였다. 줄기세포에 대한 immunocytochemical analysis는 passage 4에서 배양세포가 confluent해지면 Collagen I, HLA Class I, HLA Class II, CD34, STRO-1 등에 대한 항체반응으로 분석하였다. 줄기세포를 FACS analysis를 시행하기 위하여 72시간 동안 control medium으로 배양하고 CD14, CD44, CD45, CD146, CD34 및 STRO-1에 대한 항체를 이용하여 배양세포를 labelling하고 mouse isotope Ab을 control로 사용하였고 FACS Calibur를 이용하여 분석을 시행하였다. 3. 연구 결과 골수줄기세포와 지방줄기세포에 비하여 골막줄기세포와 특히 치수줄기세포의 형태가 세포 형태가 길쭉한 형태를 가지고 있었으며 줄기세포의 성장도에 차이가 있었고 치수줄기세포의 immunocytochemical analysis 분석 결과로 collagen I, STRO-1, HLA Class I, II 등에 대한 염색도가 증가되어 있는 것을 관찰할 수 있었으며 FACS 분석 결과로 CD34에는 negative이었고 STRO-1에 positive한 결과를 보이고 있었다. 4. 결론 치수 줄기세포는 형태학적으로 일반적인 골수 줄기세포와 유사하게 fibroblast의 형태를 띠고 있으나 미세한 차이를 보이고 있었고 골수 줄기세포와 유사하게 prolIferation rate가 우수하였고 Immunocytochemistry 분석결과와 FACS 분석결과 자가이식만이 가능할 것으로 생각되고 CD34(-), STRO(+) 등의 결과로 보아 줄기세포 임이 유추됩니다. 향후 더 많은 표본을 통한 연구 및 동물실험과 유전자 주입 연구를 통한 골형성 실험이 필요하겠지만 조직공학적 골재생에 유용한 성체 줄기세포원으로 사용이 가능하리라 생각된다.
more초록/요약
Abstract Characterization of dental pulp stem cell Jung Hoo Lee, D.D.S. Department of Oral & Maxillofacial Surgery, Graduate School of Clinical Dentistry, Korea University. (Directed by Professor Jae-suk Rim, D.D.S., M.S.D., Ph.D.) Aim of the study: The aim of this study was to investigate the characteristics of dental pulp stem cells isolated from the impacted third molar. Materials & methods: Dental pulp stem cells were isolated from an impacted third molar of 16- year old boy. Stem cells of periosteum and bone marrow were isolated during the mandibular third molar extraction in the same patient and buccal fat fad was gained also for the fat stem cell isolation. After enzymatic dissociation of dental pulp, periosteum and fat tissue, mesenchymal stem cells were cultivated in DMEM containing 10% fetal bovine serum (FBS) and antibiotics. The characteristics of stem cells was analyzed by morphological findings, immunocytochemistry and FACS analysis. Results: There were slight morphological differences among the stem cells. And the dental pulp stem cells showed mesenchymal stem cell characteristics in immunocytochemistry and FACS analysis. Conclusion: This study provided the possibility of usage of dental pulp stem cells as a source of mesenchymal stem cell for the further tissue engineering research. ------------------------------------------------------ Key words) Dental pulp stem cells. Impacted third molar, Immunocytochemistry, FACS analysis, Tissue engineering.
more목차
目 次
Abstract ⅰv
I. 서론 1
II. 연구재료 및 방법 1
III. 연구결과 4
Ⅳ. 총괄 및 고찰 5
Ⅴ. 결론 8
Ⅵ. 참고 문헌 10
그림 및 그림부도 14
