Regulation of lipopolysaccharide-induced macrophage activation by BAT3
- 주제(키워드) BAT3 , TRAF6 , lipopolysaccharide , macrophage activation
- 발행기관 고려대학교 대학원
- 지도교수 최의주
- 발행년도 2009
- 학위수여년월 2009. 8
- 학위명 석사
- 학과 일반대학원 생명공학과
- 세부전공 분자세포생물학전공
- 원문페이지 43 p
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/korea/000000008560
- 본문언어 영어
- 제출원본 000045552706
초록/요약
TRAF6는 LPS 자극으로 인한 대식세포의 활성화를 유발하는 NF-κB와 MAPK 신호전달 경로에 핵심적인 역할을 하고, 이를 통해 면역 체계를 비롯한 다양한 생리학적 반응을 조절한다. 본인은 이 연구를 수행하며, BAT3에 의한 대식세포 활성화 조절 기전을 탐구하였다. BAT3는 TRAF6와 직접 상호작용을 하고, 두 단백질 간의 결합부위가 BAT3의 ubiquitin-like domain과 TRAF6의 coiled-coil region임을 보였다. 또한 BAT3는 대식세포 활성화에 중요한 기전으로 알려진 TRAF6의 ubiquitination과 homo-oligomerization을 저해함을 확인하였다. RNA interference 기법을 통해 BAT3가 감소한 대식세포인 RAW264.7에 LPS를 처리하여 활성화한 후, 실험을 수행한 결과 BAT3B는 NF-κB와 MAPK 신호전달을 억제하고, 면역 활성 및 염증 반응을 유도하는 사이토카인 군의 유전자 발현을 낮추는 역할을 하였다. 이러한 결과를 통해 BAT3가 LPS에 의한 대식세포의 활성을 억제하는 조절 단백질로 기능함을 추측할 수 있다.
more초록/요약
TRAF6 plays a critical role in the activation processes of nuclear factor kappa B (NF- B) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway in response to bacterial lipopolysaccharide (LPS), thereby regulating diverse physiological processes such as innate immunity, adaptive immunity, and bone homeostasis. In this study, I investigated whether HLA-B associated transcript-3 (BAT3), a BAG family protein, regulates LPS-induced macrophage activation. BAT3 physically interacted with TRAF6 with the ubiquitin-like domain of BAT3 being involved in the interaction with the coiled-coil domain of TRAF6. Accordingly, BAT3 inhibited the homo-oligomerization and ubiquitination of TRAF6, both of which are necessary for the activation of TRAF6. Furthermore, Bat3 suppressed LPS-induced activation of NF-κB and MAPK signaling cascades in RAW264.7 macrophage cells. Depletion of BAT3 by RNA interference markedly increased the gene expression of pro-inflammatory cytokines, including IL-6, IL-1β, and TNF-α. These findings suggest that BAT3 functions as a negative regulator of LPS-induced macrophage activation.
more목차
List of Abbreviation….…………………….………....…...…….….i
List of Figures….………….………..…………..…..……………...ii
Abstract…...........................................................................................iii
Introduction…………………………….……………………………1
Materials and Methods……………..……………………………….6
1. Cell culture and transfection
2. Plasmids, antibodies and reagents
3. Co-immunoprecipitation and western blot analysis
4. Quantitative RT-PCR
Results…………………………………………...…………….……..9
1. BAT3 interacts with TRAF6.
2. BAT3 inhibits the TRAF6-mediated macrophage activation by LPS.
3. Lys63-linked poly-ubiquitination of BAT3 by TRAF6.
Discussion………………………………………..…………..……..27
References………………………………………..….....…..………30
Abstract in Korean………………………………………..……….34
Acknowledgement………………………………………..………..35
